Als Wohnstätte der württembergischen Herzöge verlor das Schloss Hohentübingen schon im 16. Jahrhundert an Bedeutung. Kunsthistorisch besonders wertvoll ist der 1607 erbaute Triumphbogen des Hauptportals. Es gilt als Meisterwerk der Spätrenaissance. Bereits Mitte des 18. Jahrhunderts übernahm die Universität erste Räume im Schloss und im Jahre 1816 übertrug der württembergische König Wilhelm I. das gesamte Schloss der Universität. Im Rittersaal war zeitweise die Universitätsbibliothek mit damals rund 60.000 Bänden untergebracht, im Nord-Ost-Turm richtete man eine Sternwarte ein und in der Schlossküche ein chemisches Laboratorium, das heute als „Schlosslabor” zu besichtigen ist (siehe "Führungen durch Museen und Sammlungen").
Das 1549 von Herzog Ulrich in Auftrag gegebene Fass im Schlosskeller gilt als das älteste erhaltene Riesenweinfass der Welt und ist offiziell im Guinessbuch der Rekorde verzeichnet. Es misst etwa 6,80 Meter in der Länge und rund 4,70 Meter in der Höhe. Sein Fassungsvermögen liegt bei rund 84.000 Litern und war zweimal mit Wein befüllt. Wahrlich eine Attraktion! Nur in den Wintermonaten zu besichtigen.
